柱層析硅膠時裝柱的的注意事項
裝柱子的技巧
柱層析硅膠的裝柱非常重要,裝柱的效果會直接影響層析分離效果。有濕法裝柱和干法裝柱等兩種方法。濕法裝柱很簡單,使用也最普遍,就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿,柱子底部先用脫脂棉塞緊,然后倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出。歡迎關注化學科訊。用漏斗將活好的固定相倒入柱子中,打開底部活塞,將柱子中高出固定相的溶劑放出。期間不斷用橡皮棒敲打,將固定相敲實,做到密實均勻無氣泡即可。很多時候用加壓的方法可以很高效地裝好柱子,而且在柱子中沒有氣泡產生。干法裝柱與濕法裝柱剛好相反的是,它是將干燥的吸附劑從柱子上端直接加入到一個空的柱子中,然后用油泵抽柱子底部,相當于減壓過柱,直到柱子變得很結實,再用淋洗劑“走柱子”。干法裝柱的一個缺點就是在裝入洗脫劑后,由于溶劑和固定相之間的吸附放熱,所以柱子容易變花,影響分離效果。
解決的方法是:(1)固定相一定要添加結實;(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”。直到柱子的下端不再發燙,恢復到室溫后再撤去壓力。無論使用哪種方法裝柱,最后都要求所裝的柱子結實、勻稱、無氣泡。
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