柱層硅膠的操作方式
柱層析硅膠的操作方法及注意事項
1.色譜柱填充
操作要點: 裝柱前，應在柱底墊一層脫脂棉，防止吸附劑泄漏
有兩種方法:千包裝和濕包裝
(1)安裝:柱硅膠通過漏斗不中斷地安在中，形成細流，慢慢加入管道，在硅膠也可以用像膠錘輕輕敲擊，使硅膠填料連續、均勻、緊密。在裝滿后，打開活蜜端，倒入洗滌劑洗掉，排出柱內空氣，保持一定液位
(2)濕料:將開始使用的淋浴波放)色潛中，打開下活塞，讓淋浴波慢慢流出。然后將硅膠慢慢連續地倒入柱中或將硅膠懸浮液和適量的洗脫液慢慢地加入柱中)。硅膠受重力驅動，洗脫液在柱中自由沉降，在此期間，流出的波體應不斷地加入到柱中，以保特一定的液位，直到加入硅膠，柱中的沉降不會改變，然后在硅膠。入一小塊濾紙或一點脫脂棉。根據添加的樣品量，將洗脫液的液位控制在一定高度。2.上樣
將待分離的樣品溶解在少量用于裝的洗脫波中，制成小體積,高濃度樣品溶液，加入色潛的柱層硅膠表面。如果樣品不溶于色潛性裝掛所用的洗脫液，將樣品解在揮發性溶劑中，加入適量硅膠(不超過色潛柱中硅膠總量的1/10)，用它充分混合去除溶劑，將裝有樣品的硅膠均勻加入柱頂始終保持淋洗液在一定水平)，然后覆蓋層硅膠。注意沿柱內壁慢慢加入樣品，始終保持柱層硅膠上表面光滑;樣品量為硅膠的1/60~1/30。
3.洗脫
通過薄層色譜法選擇洗脫液。一般來說TLC顯影時Rf值為0.2~0.溶劑系統為良好的洗脫系統，采用梯度洗脫首先，打開色柱下端的活塞，使洗脫液的流速保持在1-2滴/。在上端連續添加洗脫液(可使用分液漏斗控制加入速度與下端相似)，如果單一溶劑的洗脫效果不好可以用混合溶劑(一般不超過三種溶劑 進行洗脫，通常采用梯度洗脫。洗脫液的洗脫能力從弱到強逐漸增加。4.采集處理
用等于二氧化硅含量的等分試樣收集洗脫液。通過薄層定性檢查每種洗脫液，并將含有相同成分的洗脫液結合起來。一定的單一成分通?？梢酝ㄟ^濃縮和重結晶來獲得。如果它仍然是幾種單一成分的混合物，單一成分的結晶就不容易沉淀。需要進一步的色譜或通過其他方法進行分離。
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魯公安部備案號：37021402001156
